全反式维甲酸促大鼠胚胎神经干细胞向神经元分化中β连环蛋白的表达及意义

Expression and significance of β-catenin during differentiation of rat embryonic neural stem cells induced by all-trans-retinoic acid into neurons in vitro

中文关键词:  神经干细胞  全反式维甲酸  β-catenin  分化  表达  大鼠

英文关键词:Neural stem cells  All-trans-retinoic acid  β-catenin  Differentiation  Expression  Rat

中文摘要:

  【摘要】 目的：观察全反式维甲酸（all-trans-retinoic acid，ATRA）在体外促进大鼠胚胎神经干细胞（neural stem cells，NSCs）分化为神经元过程中β连环蛋白（β-catenin）的表达情况，探讨其在NSCs分化中的意义。方法：取第3代大鼠胚胎NSCs体外培养，实验组加入1.0μmol/L ATRA诱导，分别于干预后3、5、7、9d采用免疫细胞化学染色、实时荧光定量RT-PCR、Western blot检测β-catenin的表达及变化情况，对照组不加ATRA培养，于相应时间点进行相同检测。比较两组各时间点β-catenin的表达量。结果：免疫细胞化学染色示实验组在培养3～7d时β-catenin表达逐渐增强（P<0.05），7d与9d差异无统计学意义（P>0.05），实验组各时间点与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）；实时荧光定量RT-PCR检测示3～7d时β-catenin mRNA相对表达量逐渐增加（P<0.05），7d与9d差异无统计学意义（P>0.05），实验组各时间点与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）；Western blot印迹检测实验组细胞内β-catenin总蛋白、胞浆内β-catenin蛋白、胞核内β-catenin蛋白3～7d时表达量逐渐增加（P<0.05），7d与9d差异无统计学意义（P>0.05）。细胞内β-catenin的总蛋白变化趋势与RT-PCR结果相似，且胞浆内β-catenin和胞核内β-catenin的蛋白表达量随时间增加而增加。结论：NSCs分化为神经元的过程中，Wnt/β-catenin信号途径被激活，且β-catenin在细胞浆及细胞核内表达量均增多，与NSCs的分化成正调控，在细胞分化达到平衡状态时（7d～9d）表达量不再增加，表明ATRA促NSCs向神经元的分化与经典的Wnt/β-catenin信号途径有关。

英文摘要:

  【Abstract】 Objective：To investigate the expression and significance of β-catenin during differentiation of rat embryonic neural stem cells（NSCs） induced by all-trans-retinoic acid（ATRA） into neurons in vitro.Method：NSCs at passage 3 were cultured in vitro