张海龙,傅强,赵鑫,陈元贵,吴大江,侯铁胜.兔骨髓间充质干细胞在壳聚糖支架上的诱导培养[J].中国脊柱脊髓杂志,2008,(5):. |
兔骨髓间充质干细胞在壳聚糖支架上的诱导培养 |
中文关键词: 骨髓间充质干细胞 组织工程 壳聚糖 支架 兔 骨髓间充质干细胞 壳聚糖 支架上 诱导培养 scaffolds chitosan marrow mesenchymal stem cells bone rabbit culture induced 胶原表达 胶原蛋白含量 电泳 显著性差异 比较 时间点 生长状态 结果 细胞外基质 |
中文摘要: |
目的观察存壳聚糖(Chitosan)三维支架上诱导兔骨髓间充质干细胞(rMSCs)向髓核样细胞分化的情况,探讨应用其制作组织工程髓核的可能性.方法将体外培养的第3代rMSCs接种于经冷冻干燥法构建的壳聚糖三维支架上,在主要含有转化生长因子β1(TGF-β1)、胰岛素 转铁蛋白 亚硒酸钠(ITS)、地塞米松、丙酮酸钠的培养液中培养(实验组),同时设立对照组(非诱导组).在培养7d、14d、21d时取标本行组织学检测,观察三维支架上rMSCs的生长及分化情况,对支架细胞复合物行Ⅱ型胶原免疫组化检测,测定培养液中糖胺聚糖(GAG)含量及Ⅱ型胶原的表达量,计算细胞外基质GAG含量.结果rMSCs在壳聚糖三维支架上生长状态良好,体外培养7d、14d、21d时,实验组培养液中细胞外基质GAG含量分别为55.8±4.6、86.7±5.8、83.2±3.41μg/cm2,对照组培养液中细胞外基质GAG含量分别为34.2±5.6、42.6±4.8、40.8±4.4μg/cm2,两组间相同时间点比较有显著性差异(P<0.05);Ⅱ型胶原蚩白电泳及Western-blot检测实验组在培养14d与21d时可见到Ⅱ型胶原电泳条带,21d时Ⅱ型胶原蛋白含量多于14d时;对照组未见Ⅱ型胶原表达.结论rMSCs在壳聚糖三维支架上培养生长良好,在特定的诱导培养液诱导下可以向髓核样细胞分化. |
In vitro induced culture of the rabbit bone marrow mesenchymal stem cells on chitosan scaffolds |
英文关键词: |
英文摘要: |
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DOI: |
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张海龙 傅强 赵鑫 陈元贵 吴大江 侯铁胜 |
张海龙(第二军医大学附属长海医院骨科,200433,上海市) ;傅强(第二军医大学附属长海医院骨科,200433,上海市) ;赵鑫(第二军医大学附属长海医院骨科,200433,上海市) ;陈元贵(第二军医大学附属长海医院骨科,200433,上海市) ;吴大江(第二军医大学附属长海医院骨科,200433,上海市) ;侯铁胜(第二军医大学附属长海医院骨科,200433,上海市)
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