PcDNA3.1-VEGF165质粒转染神经母细胞瘤细胞后VEGF165的表达

Expression of vascular endothelial growth fator-165 in neuroblastoma cells (SH-SY5Y) transfected with PcDNA3.1-VEGF165 plasmid

中文关键词:  血管内皮生长因子(VEGF)  基因表达  质粒  基因治疗  质粒转染  神经母细胞瘤细胞  表达量  neuroblastoma cells  growth  endothelial  vascular  Expression  细胞体外培养  脂质体转染  比较差异  微量  特异性条带  分子量  上清液  转基因  显示  高效表达  统计学分析  结果

中文摘要:

  目的观察PcDNA3.1-VEGF165质粒转染神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)后VEGF165在体外的表达.方法将PcDNA3.1-VEGF165质粒应用脂质体介导的方法转染到SH-SY5Y(I组),同时建立空白对照组(Ⅱ组),两组其他试验条件均保持一致.脂转48h后,用ELISA和Westem-blot定量检测VEGF165可溶性产物.应用RT-PCR对SH-SY5Y产生的mRNA进行定性检测.对两组EUSA的定量结果进行统计学分析比较.结果脂转组(I组)PcDNA3.1-VEGF165质粒转染48h后神经母细胞瘤细胞即有VEGF165高效表达,RT-PCR可扩增到一条特异性的泳带,Western-blot显示转基因神经母细胞瘤细胞上清液中有一分子量为23kD的特异性条带.空白对照组(Ⅱ组)有微量的 VEGF165表达(84.14±33.89ng/ml),脂转组的VEGF165表达量(1005.15±185.50ng/ml)明显高于对照组.两组比较差异有显著性(P＜0.05).结论神经母细胞瘤细胞体外培养有微量VEGF165表达,PcDNA3.1-VEGF165质粒可通过脂质体转染体外培养的神经母细胞瘤细胞,被转染的神经母细胞瘤细胞能够高效表达VEGF165.

英文摘要: