细胞凋亡信号调节激酶1在脊髓缺血再灌注损伤中的作用

The role of apoptosis signal-regulating kinase 1 in reperfusional injury of ischemic spinal cord

中文关键词:  缺血再灌注损伤  脊髓  细胞凋亡信号调节激酶1  14-3-3蛋白

英文关键词:Ischemical reperfusional injury  Spinal cord  Apoptosis signal-regulating kinase 1  14-3-3 protein

中文摘要:

  目的：探讨细胞凋亡信号调节激酶1（apoptosis signal-regulating kinase1,ASK1）在脊髓缺血再灌注损伤中的作用及机制。方法：20只新西兰大白兔随机分成4组,每组5只,分别为对照组（A组）、缺血30min/再灌注15min组（B组）、缺血30min/再灌注1h组（C组）、缺血30min/再灌注24h组（D组）,脊髓缺血再灌注损伤模型应用腹主动脉阻断法制作。光镜及电镜观察各组脊髓组织病理变化,Westernblot检测脊髓组织中ASK1的蛋白表达及活化情况,免疫共沉淀分析ASK1与14-3-3蛋白间相互作用,免疫组织化学染色观察活化ASK1（pASK1）及14-3-3蛋白在细胞内的定位表达。结果：光镜检查B组的脊髓组织形态学与A组比较无明显改变,C组及D组脊髓间质明显出血,神经细胞肿胀;电镜检查C组及D组神经细胞出现细胞核浓缩、染色质聚边、脱髓鞘改变等早期凋亡征象;Westernblot蛋白电泳显示B组ASK1无明显活化,C组及D组ASK1显著活化;免疫共沉淀分析提示ASK1与14-3-3蛋白在C组及D组发生蛋白分离;免疫组织化学染色显示缺血再灌注时pASK1与14-3-3蛋白均在细胞浆内表达。结论：ASK1介导的凋亡信号转导途径参与脊髓缺血再灌注的损伤过程,14-3-3蛋白与ASK1蛋白的分离可能是导致ASK1活化的机制之一。

英文摘要:

  Objective:To investigate the role and mechanism of apoptosis signal-regulating kinase 1(ASK1) in reperfusional injury of ischemic spinal cord.Method:20 New Zealand white rabbits were divided into four groups randomly,including control group(group A,n=5),i